用紫外分光光度计检测果品中的甲基硫菌灵和多菌灵

 时间:2016-12-11  贡献者:苏方

导读:国光多菌灵松尔甲基硫菌灵代森锰锌多肉月季广谱内吸杀菌剂200g,落 叶 果 树  D EC I D UO US  FRU ITS 2007 ( 3 )                用紫外分光光度计检测果品中的甲基硫菌灵和多菌灵李  庆 ,李文新(山东省泰山职业技术学院 ,泰安 271000

国光多菌灵松尔甲基硫菌灵代森锰锌多肉月季广谱内吸杀菌剂200g
国光多菌灵松尔甲基硫菌灵代森锰锌多肉月季广谱内吸杀菌剂200g

落 叶 果 树  D EC I D UO US  FRU ITS 2007 ( 3 )                用紫外分光光度计检测果品中的甲基硫菌灵和多菌灵李  庆 ,李文新(山东省泰山职业技术学院 ,泰安 271000 )   摘  要 : 提取和分离果品中的甲基硫菌灵和多菌灵待测液 , 用紫外分光光度计在 282nm 处测定吸光度 , 与同样方法测定并绘制的标准曲线比较 ,即可得到甲基硫菌灵和多菌灵的含量 。

   关键词 : 甲基硫菌灵 ; 多菌灵 ; 紫外分光光度计    中图分类号 :  S66      文献标识码 :  B     文章编号 :  1002 - 2910 (2007) 03 - 0047 - 02   甲基硫菌灵 (又名甲基托布津 ) 是一种广 谱内吸型杀菌剂 , 被广泛用于防治果品的轮纹 病和黑腐病及贮藏期的青霉病和绿霉病等 。

但 因生产商和销售环节中的违规操作 , 使果品中 甲基硫菌灵的含量超过国家标准 ( GB14870 94 )规定 ,最高残留限量每千克不超过 015mg。

为防止高残留农药的果品及加工品上市 , 国家 要求在销售前按国标 SN0162 - 92 用气相色 谱— 质谱仪法 ,测定甲基硫菌灵的含量 。

但仪 器昂贵 ,操作技术复杂 。

为此笔者介绍一种简 便易行 、 准确可靠 、 一般实验室即可测试的紫外 分光光度计测定法 。

1  标准储备液和使用液的配制 精确称取 50mg 甲基硫菌灵可湿性粉剂 , 放入烧杯中 , 用三氯甲烷溶解 , 定容至 50m l。

从中准确吸取 10100m l甲基硫菌灵的标准液 , 移入 100m l容量瓶中 ,用三氯甲烷稀释至刻度 , 制成甲基硫菌灵标准使用液 。

同样精确称取 50mg 多菌灵放入 50m l 容 量瓶中 , 用 1mol/L 盐酸溶液溶解并定容至刻 度 。

再准确吸取 10100m l多菌灵标准储备液 , 移入 100m l容器瓶中 ,用 1mol/L 盐酸溶液定容 至刻度 ,制成多菌灵标准使用液 。

收稿日期 : 2006 - 12 - 202  待测样品的提取和分离随机抽取果实样品 ,用清水洗去泥沙 ,晾干 或用吸水纸吸干果实表面的水 。

将果实纵切分 成两等份 ,取果肉部分 ,置于干燥的组织捣碎机 或研 钵内 破碎 磨细 。

称 取 50g 果泥 样 品 , 加 50m l甲醇 , 用高速离心机 (每分钟 6000 转 ) 离 心分离 10 分钟 ,移上清液于烧杯中 。

沉淀物用 20m l甲醇搅匀后 , 加水 10m l, 作用 10 分钟 , 再 次高速离心 10 分钟 。

上清液并入盛滤液的烧 杯中 ,在 80 ℃水浴上用热空气流吹去部分甲 醇 ,倒 入 分 液 漏 斗 中 , 加 10% 的 氯 化 钠 溶 液 30m l和 25m l石油醚 , 混合摇动 2 分钟后 , 再加 25m l石油醚振摇 2 分钟以充分提取待测物药 液 。

除去石油醚 ,加盐酸提高酸度至 pH 值 1 ~ 2,用二氯甲烷提取两次 (每次加 25m l, 作用 2 分钟 ) 。

合并两次的提取液 , 用 25m l蒸馏水洗 涤 1 次 ,用尖嘴吸管吸出二氯甲烷层 ,移入干燥 的分液漏斗中 , 供甲基硫菌灵含量测定之用 。

水洗液合并入水层 ,留作多菌灵测定用 。

3  测定残毒 3. 1   绘制标准曲线 准确吸取 010、 011、 013、 015m l甲基硫菌灵 μg 甲基硫菌 标准使用液 (相当于 0、 10、 30、 50作者简介 : 李庆 ( 1966 - ) ,女 ,山东肥城人 ,实验师 ,现从事农业工程教学和实验研究工作 。

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灵 ) , 分别置于 30m l 圆底离心器中 , 离心挥干 溶剂后 ,各加入 10m l乙酸 - 乙酸铜溶液及 2 ~ 5 粒玻璃珠 ,接上空气冷凝器 , 于酒精灯或微型 电炉上缓缓加热煮沸 30 分钟取下 , 用 20m l浓 度为 1mol/L 的盐酸洗涤冷凝管和圆底离心管 , 作用 2 分钟 。

将液体移入 125m l分液漏斗中 。

用二氯甲烷提取 2 次 , 每次用量 10m l。

用尖嘴 吸管吸出二氯甲烷层移入备用的干燥分液漏斗 中 。

上述酸溶液用 2mol/L 的氢氧化钠中和 ,调 整 pH 值至 610 ~615 (碱液用量为 25m l) ,中和 液用二氯甲烷提取 2 次 , 每次 20m l, 把两次的 提取液合并在一起 ,再用 10m l蒸馏水洗涤分液 漏斗 ,静置分层后 ,将二氯甲烷层并入另一存有 二氯甲烷层的分液漏斗中 。

准确加入 10m l浓 度为 1mol/L 盐酸 ,再次提取 5 分钟 ,静置 10 分 钟左右 。

待分层后 , 将酸提取液倒入 1cm 石英 双色杯中 ,用 1mol/L 的盐酸调节分光光度计的 μg甲基硫 零点 ,在波长 282nm 处分别测 0 ~50 菌灵标准液的吸光度 (A282 ) 。

以 A282 值为纵 坐标 ,甲基硫菌灵的含量为横坐标 ,绘制甲基硫 菌灵的标准曲线 。

准确吸取 010、 011、 013、 015m l多菌灵标准 μg 多菌灵 ) , 放入 使用液 (相当于 0、 10、 30、 50 分液漏斗中 , 各加入 20m l浓度为 1mol/L 的盐 酸 ,用二氯甲烷提取 2 次 , 每次用 10m l。

用尖 嘴吸管吸出二氯甲烷层 , 移入干燥的分液漏斗 中 。

酸液用 2mol/L 的氢氧化钠溶液中和至 pH 值 610 ~615,用二氯甲烷提取 2 次 ,每次 20m l, 提取液用 10m l蒸馏水洗涤 1 次 。

静置分层后 , 将两次的二氯甲烷层合并 ,准确加入 10m l浓度 为 1mol/L 的盐酸 , 再次酸提 5 分钟 。

静置 10 分钟 。

待分层后 ,将酸提液倒入 1cm 石英双色 杯中 , 用 1mol/L 的盐酸调节分光光度计的零 μg 多菌灵 点 。

在波长 282nm 处分别测 0 ~50 标准液的吸光度值 (A282 ) 。

以 A282 值为纵坐 标 ,多菌灵的含量为横坐标 ,绘制多菌灵的标准 曲线 。

3. 2   测定果品中的甲基硫菌灵和多菌灵含量 取果肉的二氯甲烷提取液 , 自然挥干或加 热挥干后 ,用 10m l乙酸 - 乙酸铜溶液分次溶解48残渣 ,并移入 30m l圆底离心器中 ,加 2 ~5 粒玻 璃珠 ,接上空气冷凝管 ,用酒精灯或微型电炉缓 缓煮沸 30 分钟取下 ,用 20m l浓度为 1mol/L 的 盐酸从冷凝管顶端洗涤冷凝管和圆底离心管 , 作用 2 分钟 。

将液体移入 125m l分液漏斗中 , 用二氯甲烷提取 2 次 , 每次用量 10m l。

用尖嘴 吸管吸出二氯甲烷层移入备用的干燥分液漏斗 中 。

上述酸溶液用 2mol/L 的氢氧化钠中和 ,调 整 pH 值 610 ~615 (碱液用量为 25m l) 。

中和 液用二氯甲烷提取 2 次 , 每次 20m l, 把两次的 提取液合并在一起 ,再用 10m l蒸馏水洗涤分液 漏斗 ,静置分层后 ,将二氯甲烷层并入另一种存 有二氯甲烷层的分液漏斗中 ,准确加入 10m l浓 度为 1mol/L 的盐酸 , 再次提取 5 分钟 ,静置 10 分钟左右 。

待分层后 ,将酸提取液倒入 1cm 石 英双色杯中 ,用 1mol/L 的盐酸调节分光光度计 零点 。

在波长 282nm 处测样品的吸光度 。

与 甲基硫菌灵的标准曲线比较 , 计算样品中甲基 硫菌灵的含量 。

取“ 待测样品的提取和分离 ” 中的多菌灵 测定液 ,用 2mol/L 氢氧化铵溶液中和至 pH 值 610 ~615,用二氯甲烷提取 2 次 , 每次 20m l, 提 取液用 10m l蒸馏水洗涤 1 次 , 静置分层后 , 将 两次的二氯甲烷层合并 ,准确加入 10m l浓度为 1mol/L 盐酸 ,再次酸提 5 分钟 。

静置 10 分钟 , 待分层后 , 将酸提液倒入 1cm 石英双色杯中 , 用 1mol/L 的盐酸调节分光光度计零点 。

在波 长 282nm 处测定样品的吸光度 。

与多菌灵的 标准曲线比较 ,计算样品中多菌灵的含量 。

测定结果按下式计算 : V1 × C   X = × 100 m× V2 式中 V1 为加入提取溶剂的总毫升数 ; m 为样 品重量 ( g) ; V2 为测定时使用提取溶剂的毫升 数 ; C 为相当于标准浓度 ( m g) ; X 为样品中甲 基硫菌灵的含量 (mg / kg) 。

(注意 : 用石油醚和二氯甲烷萃取的整个过程 , 不论加入量还是取出量 ,必须准确 、 快速 。

当甲 基硫菌灵残留量过高时 , 可减少样品的用量或 ) 增加稀释倍数 。

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